安利纽崔莱润妍饮品的作用改善皮肤水份
产品名称 安利纽崔莱润妍饮品
功效成分/标志性成分含量 每100g含：蛋白质 23.75g、羟脯氨酸 1.9g、维生素C 500mg、维生素E 62mg、透明质酸 220mg
主要原料 水解胶原蛋白、维生素C（维生素C、玉米淀粉）、针叶樱桃提取物（针叶樱桃提取物、麦芽糊精）、透明质酸钠、维生素E（DL-α-生育酚醋酸酯、改性淀粉、麦芽糊精、二氧化硅）、赤藓糖醇、天然橙味香精（蔗糖、麦芽糊精、甜橙油、磷脂、二氧化硅、α-生育酚）、柠檬酸、黄原胶、甜菊糖苷
安利纽崔莱润妍饮品适宜人群 皮肤干燥者
不适宜人群 少年儿童、孕妇、乳母
食用方法及食用量 每日1包，每包用150ml水冲调，搅拌均匀后饮用 
申请人中文名称 安利（中国）日用品有限公司
申请人地址 广州经济技术开发区北围工业区一区
安利纽崔莱润妍饮品保健功能 改善皮肤水份

纽崔莱润妍饮品


产品规格 8g/包
保质期 18个月
贮藏方法 贮存于30℃以下的阴凉干燥处
注意事项 本品不能代替药物；本品添加了营养素，与同类营养素同时食用不宜超过推荐量
批准日期 2013-06-24
产品编号 32075
批准文号 国食健字G20130388


保健食品产品技术要求
BJG20130388
纽崔莱润妍饮品
NiuCuiLaiRunYanYinPin
 
【配方】 水解胶原蛋白、维生素C（维生素C、玉米淀粉）、针叶樱桃提取物（针叶樱桃提取物、麦芽糊精）、透明质酸钠、维生素E（DL-α-生育酚醋酸酯、改性淀粉、麦芽糊精、二氧化硅）、赤藓糖醇、天然橙味香精（蔗糖、麦芽糊精、甜橙油、磷脂、二氧化硅、α-生育酚）、柠檬酸、黄原胶、甜菊糖苷
【生产工艺】  本品经混合、分装等主要工艺加工制成。
【感官要求】 应符合表1的规定。
表1    感官要求
项    目 指    标
色泽 黄色乳白色相间
滋味、气味 酸甜味，柑橘类水果香味
性状 粉末
杂质 无肉眼可见杂质
 
【鉴别】  无
【理化指标】 应符合表2的规定。
表2    理化指标
项    目 指    标 检测方法
水分，g/100g ≤5.0 GB 5009.3-2010
灰分，g/100g ≤1.0 GB 5009.4-2010
铅（以Pb计），mg/kg ≤0.5 GB 5009.12-2010
砷（以As计），mg/kg ≤0.3 GB/T 5009.11-2003
【微生物指标】 应符合表3的规定。
表3    微生物指标
项    目 指    标 检测方法
菌落总数，cfu/g ≤30000 GB 4789.2-2010
大肠菌群，MPN/100g ≤90 GB/T 4789.3-2003
霉菌，cfu/g ≤25 GB 4789.15-2010
酵母，cfu/g ≤25 GB 4789.15-2010
致病菌（指沙门氏菌、志贺氏菌、金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌） 不得检出 GB 4789.4-2010、GB/T 4789.5-2003、GB 4789.10-2010、GB/T 4789.11-2003
【标志性成分含量测定】 应符合表4的规定。
表4    标志性成分含量测定
项    目 指    标 检测方法
蛋白质，g/100g ≥23.75 GB 5009.5-2010
羟脯氨酸，g/100g ≥1.9 1 羟脯氨酸的测定
维生素C，mg/100g 400～900 GB 5413.18-2010
维生素E，mg/100g 49.6～112 GB 5413.9-2010
透明质酸，mg/100g ≥220 2 透明质酸的测定
 
1  羟脯氨酸的测定
1.1  原理：样品在硫酸溶液中水解释放出羟脯氨酸，经氯胺-T氧化生成含有吡咯环的氧化物，用高氯酸破坏过量的氯胺-T，羟脯氨酸氧化物与对二甲氨基苯甲醛反应生成红色化合物，在560nm波长处进行比色测定。
1.2  仪器
1.2.1  紫外分光光度计
1.2.2  Mettler AT 261分析天平
1.2.3  pH计
1.2.4  水浴锅
1.2.5  电热恒温鼓风干燥箱
1.2.6  振荡器
1.2.7  实验室其它标准的玻璃器具和分析测量仪器
1.3  试剂
1.3.1  标准对照品：反式-4-羟脯氨酸（Sigma公司或等同产品）
1.3.2  高氯酸
1.3.3  浓硫酸
1.3.4  柠檬酸
1.3.5  氯胺-T
1.3.6  三水合乙酸钠
1.3.7  氢氧化钠
1.3.8  异丙醇
1.3.9  正丙醇
1.3.10  4-二甲氨基苯甲醛
1.3.11  缓冲液（pH6.8）：称取26g一水合柠檬酸、14g氢氧化钠和78g三水合乙酸钠，用500mL水溶解，用酸或碱调节pH值至6.8，再加入250mL正丙醇，并用水定容至1L。
1.3.12  氧化剂：精确称取1.41g氯胺-T溶于100mL缓冲液中。该溶液临用前配制。
1.3.13  显色剂：称取10g4-二甲氨基苯甲醛溶于35mL60%（w/w）高氯酸中，缓慢加入65mL异丙醇。临用前配，当天配制。
1.4  羟脯氨酸标准溶液（600μg/mL）的配制：精确称取60mg反式-4-羟脯氨酸，加水溶解，加一滴硫酸溶液（3mol/L），定容至100mL。该溶液在4℃下可稳定保存1个月。
1.5  羟脯氨酸标准使用液的配制：吸取5mL羟脯氨酸标准溶液，用水稀释并定容至500mL。该溶液须现用现配。吸取10、20、30、40mL上述稀释液，分别用水稀释并定容至100mL，这些稀释液中羟脯氨酸的含量分别为0.6、1.2、1.8、2.4μg/mL，须现用现配。
1.6  标准曲线的绘制：吸取1.5项羟脯氨酸标准使用液稀释液各4.0mL于4支试管中，用4.0mL水作空白对照，按1.8项样品测定，以吸光度值为纵坐标，羟脯氨酸含量（µg/mL）为横坐标，绘制标准曲线。
1.7  样品处理：取适量样品于具塞锥形瓶中，加入硫酸溶液（3mol/L）30mL，盖塞，置105℃干燥箱内恒温水解16h，趁热将水解产物过滤至200mL容量瓶中，用10mL硫酸溶液（3mol/L）分数次洗涤锥形瓶和滤纸，合并至200mL容量瓶中，用氢氧化钠溶液将水解液pH值调至6～8，冷却后加水至刻度，摇匀，稀释并定容滤液，使其浓度在0.6～2.4μg/mL，即为样品测定液。
1.8  样品测定：吸取羟脯氨酸标准使用稀释液各4.0mL于试管中，用4.0mL水作空白对照，向各试管中加入2.0mL氧化剂溶液，振荡混匀，反应20min后，向各试管中加入2.0mL显色剂，充分混合，盖上箔帽或螺帽，于60±0.5℃水浴20min，用流动水冲洗试管3min使其冷却，在室温下放置30min，用10mm比色皿检测各反应液于560±2nm波长处的吸光度值。
1.9  结果计算
D×c
X = ————
M×V
式中：
X—样品中羟脯氨酸含量，g/100g；
c—从标准曲线上查得相应的羟脯氨酸含量，µg/mL；
m—样品质量，µg；
D—样品被稀释的体积数；
V—所用滤液体积，mL。
2  透明质酸的测定
2.1  原理：样品中透明质酸的检测采用R&D Systems 的DuoSet透明质酸检测试剂盒，该试剂盒采用ELISA（酶联免疫吸附试验）原理，通过酶标仪于450nm波长处测定吸光度值并计算样品中透明质酸的含量。
2.2  试剂
本方法所用水均为纯水，所用试剂均为分析纯。
2.2.1  DuoSet透明质酸检测试剂盒
2.2.1.1  捕获试剂：加入0.25mL PBS溶解后浓度为120µg/mL，分装适量到冻存管于低温冰箱（-20～-70℃）中可保存3个月备用，如果保存在2～8℃冰箱可保存1个月备用，在使用时用PBS稀释成0.5µg/mL的工作浓度。
2.2.1.2  检测试剂：加入0.25mL试剂稀释液溶解后浓度为72µg/mL，分装适量到冻存管于低温冰箱（-20～-70℃）中可保存3个月备用，如果保存在2～8℃冰箱可保存4个月备用，使用时用试剂稀释液稀释成0.3µg/mL的工作浓度。
2.2.1.3  标准品：加入0.5mL试剂稀释液溶解后浓度为1720ng/mL，分装适量到冻存管于低温冰箱（-70℃）中可保存3个月备用，如果保存在2℃～8℃冰箱可保存1个月备用，使用时用试剂稀释液稀释成90ng/mL的最高标准工作浓度然后作3倍系列稀释。
2.2.1.4  酶标试剂：2～8℃冰箱保存，按标签上说明用试剂稀释液稀释。
2.2.1.5  底物溶液：底物试剂A和底物试剂B于2～8℃冰箱保存，使用时按1:1混合。
2.2.1.6  终止液：2N H2SO4，于2～8℃冰箱保存。
2.2.2  PBS：取8.0g NaCl、0.2g KCl、1.15g Na2HPO4、0.2g KH2PO4溶于1000mL纯水中，用0.2µm滤膜过滤。
2.2.3  吐温20
2.2.4  洗板液：将吐温20溶于PBS中制成浓度为0.05%的溶液，并调节pH值至7.2～7.4。
2.2.5  包被液：将吐温20溶于PBS中制成浓度为5%的溶液。
2.2.6  试剂稀释液：将吐温20溶于PBS中制成浓度为5%的溶液，并调节pH值至7.2～7.4。
2.3  仪器
2.3.1  96孔微孔板
2.3.2  冻存管：2mL、4mL
2.3.3  离心机：转速＞2000r/min
2.3.4  定量移液枪：2～20µL、20～200µL
2.3.5  低温冰箱：-70℃
2.3.6  灭菌锅
2.3.7  酶标仪：450nm
2.3.8  过滤装置
2.3.9  容量瓶：50mL、100mL
2.3.10  分析天平：感量0.1mg
2.4  样品制备：准确称取适量样品于100mL容量瓶，用适当的稀释剂定容至刻度，充分混匀，标准曲线的浓度梯度为90、30、10、3.33、1.11、0.37ng/mL。根据样品中透明质酸钠的含量作适当稀释，最后一步的稀释要使用包被液稀释，使样品最终的浓度落在标准曲线的中间范围（10～2.5ng/mL）。
2.5  样品测定：用PBS将捕获试剂稀释成0.5μg/mL的工作液（不带蛋白），立刻包被酶标板，每孔100μL，密封，室温孵育过夜，洗涤（倒去捕获试剂，用洗板液洗涤三次，每孔约400μL，每次2min，每次洗涤后都要完全甩干净洗液，有利于得到更好的结果，最后一次洗完，在干净纸巾彻底拍干）。加包被液，每孔300μL，室温孵育至少1h，同上法洗涤。将样品和标准工作溶液分别加入到孔中，每孔100μL，用新的封膜密封，室温孵育2h，同上法洗涤。每孔加100μL检测试剂（0.3μg/mL），封膜密封，室温孵育2h，同上法洗涤。每孔加100μL辣根过氧化物酶标记链霉亲和素（Streptavidin-HRP），封膜密封，室温下避光孵育20min，同上法洗涤。每孔加100μL底物溶液，室温下避光孵育20min，每孔加50μL终止液，轻弹微孔板以混匀，15min内放入酶标仪（450nm）中检测每孔的光密度。
2.6  结果计算
C×F×100
X = ————————
M×1000×1000
式中：
X—样品中透明质酸含量，mg/g；
C—从标准曲线上得到的样品中透明质酸的平均含量，ng/mL；
F—稀释因子；
100—样液体积，μL；
M—样品称取量，g；
1000×1000—ng换算为mg。
【保健功能】  改善皮肤水份
【适宜人群】  皮肤干燥者
【不适宜人群】  少年儿童、孕妇、乳母
【食用方法及食用量】  每日1包，每包用150ml水冲调，搅拌均匀后饮用
【规格】  8g/包
【贮藏】  贮存于30℃以下的阴凉干燥处
【保质期】  18个月

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